普遍大家都知道濃縮是藉由超濾膜來進行蛋白質和DNA等濃縮和純化,且可以透過不同膜材質搭配不同樣品特性來提高蛋白質的回收率。

但今天要來告訴大家濃縮管除了濃縮回收步驟外,也可以輕鬆利用濃縮管來透析(去鹽)和緩衝液體的交換


一般來說,蛋白質可以被合適的超濾膜截留,但鹽類可以自由透過,不受蛋白質濃度和膜分子截留量影響,因此蛋白質濃縮後,濾出液和截留液中的緩衝液成分會保持不變,如此一來,即可利用水或無鹽緩衝液對濃縮物進行稀釋,達到透析的效果;亦可利用新的緩衝液稀釋濃縮物,進而完全置換緩衝物質。

當然Sartorius出產的Vivaspin濃縮管,更可以完美有效的做到濃縮、透析和置換緩衝溶液,因為Vivaspin具有其獨特且出色的特性:

 

 

  ●專利的垂直膜設計
  ●保留死體積回收器
  ●多種低吸附性的膜材質選擇,讓樣品找到合適的膜

 

 

經測試結果如下表: Vivaspin濃縮管在第一次離心時,即去除95%以上的鹽,隨後再進行第二次離心,即可去除99%鹽類,且樣品回收率>92%。



只要掌握一些技巧便可以有效做到「透析+濃縮」一步到位的小訣竅,幫您省去使用透析袋後再離心濃縮的時間!!



●進行透析和緩衝液體置換,您只需要根據以下步驟:

1.選擇適合您樣品的截留分子量MWCO。

2.加入適當的樣品體積

3.若樣品小於最大裝置之濃縮管體積,可在離心之前將其稀釋到最大體積,可有助於提高透析效果。

4.以適當的離心轉速進行離心。

5.清空濾液管中的濾液。

6.利用合適的溶劑再次填滿濃縮管。

7.再次進行離心。

8.清空濾液管中的濾液。

9.利用pipetman從濃縮管的底部得到濃縮且脫鹽的樣品。



★★最後再來複習一次,使用Vivaspin的濃縮管可以做到哪些事情呢?

● 樣品去鹽: 使用Vivaspin濃縮管進行透析與緩衝液置換。

● 樣品濃縮: 使用Vivaspin濃縮管濃縮,可濃縮到最終體積。

● 樣品回收: 使用Vivaspin濃縮管處理,可改善低濃度蛋白質樣品回收率。​

 

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